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電泳加工的另一種--瓊脂糖凝膠電泳
發布時間:2019-06-22 點擊次數:次
瓊脂糖凝膠電泳是用瓊脂糖作支持介質(起決定作用的物質)的一種電泳方法。電泳廠家帶電顆粒在電場作用下,向著與其電性相反的電極移動,稱為電泳(electrophoresis, EP)。利用帶電粒子在電場中移動速度不同而達到分離的技術稱為電泳技術。陰極電泳根據被涂物的極性和電泳涂料的種類,電泳涂裝法可分為兩種,陰極電泳涂裝法被涂物為陰極,所采用的電泳涂料是陽離子型(帶正電荷)。其分析(Analyse)原理與其他支持物電泳主要區別是:它兼有 ;分子篩 ;和 ;電泳 ;的雙重作用. 一般的核酸檢測(檢查并測試)只需要瓊脂糖凝膠電泳就可以;如果需要分辨率高的電泳,特別是只有幾個bp的差別應該選擇(xuanze)聚丙烯酰胺(acylamide)凝膠電泳;用普通電泳不合適的巨大DNA鏈應該使用脈沖凝膠電泳。注意(attention)巨大的DNA鏈用普通電泳可能(maybe)跑不出膠孔導致(cause)缺帶。瓊脂糖凝膠電泳是用瓊脂或瓊脂糖作支持介質的一種電泳方法。對于分子量較大的樣品,如大分子核酸、病毒等,一般可采用孔徑(aperture)較大的瓊脂糖凝膠進行電泳分離。這是我做病毒檢測實驗(experiment)試劑盒的說明書部分,看是否對你有幫助:配制1%的膠進行電泳1 稱取0.4g瓊脂糖放于錐形(taper)瓶中,再量取40ml的0.5×TBE溶液混合,放于微波爐中煮沸,至溶液清徹透明為止,大約需1分40秒。2 冷卻到60℃時(放于掌心,能感覺到湯但又能忍受。)加2μl核酸染料,搖勻。3 組合安裝好制膠器,并調至水平。將膠倒于制膠器中,插好梳子。待40分鐘膠冷卻凝固(solidification)后,就可放于倒好電泳緩沖液的電泳槽中進行點樣。4 取5-10μl樣品溶液,加1-2μl 6×loading Dye,混合均勻(jūn yún)后進行點樣。每排點樣孔突出點一個5μl的Marker。5 點完后,調電泳儀各參數(parameter)進行電泳:U:80V;A;200A;T:40min。做實驗需要注意的一點就是要戴手套操作控制,保護好自己。像如果用的核酸染料是EB、緩沖液是TAE的話,就要更加小心了,那玩意兒致癌性比較強;像我們用的是GoldViewTM 核酸染料和TAE還不是特別要緊還有就是,這里說的40ml制的一般都是25孔的中膠,你要根據所需要的孔數來按比例調節用量。黑色電泳隨著汽車工業的發展,先進的汽車涂裝特別是轎車涂裝技術和設備在我國得以快速應用。目前,在我國安裝的涂裝設備的水平已經有了很大進步,今后隨著水性漆及粉末涂料等環保涂料的使用,我國的涂裝技術水平將整體達到世界先進水平。膠不能制的太厚或者太薄,二者都不利于電泳的。煮膠的時候,一定要讓膠完全溶合(拿起來對著光照看,沒有亮亮的小點出現),不然跑出來的膠不好看;煮的時間也不能太長,煮久了對樣品的回收這類的可能(maybe)有影響(influence)的。
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